TPRC3通道对MPP+所致MN9D细胞损伤的保护作用

摘要

目的 探讨经典瞬间受体电位通道蛋白(transient receptor potential canonical channel,TRPC)家族在1甲基4苯基吡啶离子(1 Methyl 4 phenylpyridinium ion,MPP+)导致的MN9D细胞毒性损伤中的作用.方法 用不同浓度(62.5、125、250、500、1 000 μmol/L)的MPP+处理MN9D细胞24 h,500 μmol/L MPP+处理MN9D细胞不同时间(3、6、12、24、36 h),建立细胞损伤模型.用RT PCR的方法检测MN9D细胞中内源性TRPC的表达情况;500 μmol/L MPP+作用于MN9D细胞,以Western blot法检测MN9D细胞内源性TRPC表达的变化;构建GFP与TRPC3 GFP腺病毒载体,转染到MN9D细胞中,以四甲基偶氮唑盐比色法(methods the tetrazolium,MTT)的方法检测过表达的TRPC3对MPP+引起的MN9D细胞损伤的保护作用.结果 500 μmol/L MPP+处理MN9D细胞6h就可以显著降低细胞内TRPC3蛋白水平的表达,但对TRPC6的表达无影响.过表达TRPC3能够保护MN9D细胞免受MPP+的毒性损伤.结论 MPP+特异性地降低MN9D细胞TRPC3蛋白水平,过表达TRPC3可以抑制MPP+引起的MN9D细胞损伤.这种现象提示TRPC3通道可能参与了帕金森病发病的分子机制.