siRNA沉默t-bet基因对CD4、CD8 T淋巴细胞亚群IFN-γ产生的影响

摘要

利用化学合成针对人t-bet基因的小干扰RNA( siRNA),转染体外培养的人外周血单个核细胞,利用流式细胞仪分选纯化CD4+、CD8+ T淋巴细胞,半定量RT-PCR检测CD4+、CD8+ T淋巴细胞中t-bet mRNA 的表达变化,流式细胞术检测转染前后IFN-γ产生的变化情况.探讨转录因子t-bet对人CD4+、CD8+ T淋巴细胞亚群IFN-γ产生的调控作用.与对照组相比,转染后的人CD4+、CD8+ T淋巴细胞t-bet mRNA 表达水平明显下降;转染siRNA后,CD4+ T淋巴细胞中IFN-γ+细胞比例为(18.46±6.86)%,与对照组(50.20±5.91)%比较有显著性差异(P< 0.01);CD8+ T淋巴细胞IFN-γ+细胞比例为(74.18±9.33)%,和对照组(76.51±6.49)%比较差异不明显(P> 0.05).体外转录合成的siRNA可有效降低人CD4+、CD8+ T淋巴细胞t-bet的基因表达;转录因子t-bet对人不同淋巴细胞亚群IFN-γ的产生所起作用不同.