理气通便方对功能性便秘气滞证大鼠脑肠肽的影响

摘要

目的 探讨理气通便方治疗功能性便秘的机制.方法 采用复方地芬诺酯灌胃及夹尾激怒法构建功能性便秘气滞证大鼠模型.按照随机数字表法将48只雌雄各半大鼠分为空白组、模型组、莫沙必利组(2 mg/kg)、理气通便方低剂量组(5.15 g/kg)、理气通便方中剂量组(10.3 g/kg)、理气通便方高剂量组(20.6 g/kg),每组8只,连续给药14 d.观察各组大鼠一般情况、灌胃墨汁后首粒黑便排出时间、粪便干湿重变化.ELISA法检测血清5-羟色胺(5-HT)、血管活性肠肽(VIP)、去甲肾上腺素(NE)的含量.Real-time PCR法检测结肠组织中P物质(SP)、促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)mRNA表达.Western blot法测定结肠组织中SP、CRF蛋白表达.结果 治疗前,与空白组比较,模型组及各给药组大鼠首粒黑便排出时间延长(P＜0.01),粪便含水率降低(P＜0.01).经过7 d治疗后,与模型组比较,各给药组大鼠首粒黑便排出时间均缩短(P＜0.05,P＜0.01),理气通便方高剂量组大鼠粪便含水率升高(P＜0.05).治疗14 d后,与模型组比较,各给药组大鼠首粒黑便排出时间均缩短(P＜0.01),莫沙必利组及理气通便方中、高剂量组大鼠粪便含水率升高(P＜0.05,P＜0.01).与莫沙必利组比较,理气通便方高剂量组大鼠首粒黑便排出时间缩短(P＜0.05).经过14 d治疗后,与空白组比较,模型组、莫沙必利组和理气通便方各剂量组5-HT含量降低(P＜0.05,P＜0.01),模型组、莫沙必利组和理气通便方低剂量组NE含量升高(P＜0.01),理气通便方高剂量组NE含量降低(P＜0.01),模型组、莫沙必利组、理气通便方各剂量组VIP含量升高(P＜0.05,P＜0.01),模型组、莫沙必利组和理气通便方低剂量组SP、CRF mRNA及SP蛋白表达水平降低(P＜0.05,P＜0.01),理气通便方中、高剂量组SP蛋白表达水平升高(P＜0.05,P＜0.01),模型组、莫沙必利组及理气通便方各剂量组CRF蛋白表达水平均降低(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,莫沙必利组及理气通便方各剂量组5-HT含量升高(P＜0.01);莫沙必利组和理气通便方中、高剂量组NE含量降低(P＜0.01);莫沙必利组及理气通便方各剂量组VIP含量降低(P＜0.01);理气通便方中、高剂量组SP mRNA及SP蛋白表达水平升高(P＜0.01),理气通便方各剂量组CRF mRNA及CRF蛋白表达水平升高(P＜0.05,P＜0.01),理气通便低剂量组大鼠SP蛋白表达水平降低(P＜0.01).与莫沙必利组比较,理气通便方低剂量组NE、VIP含量升高(P＜0.01),理气通便方中剂量组NE含量降低(P＜0.01),VIP含量升高(P＜0.05),理气通便方高剂量组NE、VIP含量均降低(P＜0.05,P＜0.01),理气通便方中、高剂量组5-HT含量、SP mR-NA及SP蛋白表达水平升高(P＜0.01),理气通便方各剂量组CRF mRNA及CRF蛋白表达水平升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 理气通便方通过改善大鼠胃肠动力和肠道水液代谢达到治疗功能性便秘的作用,其机制可能与调节脑肠肽的分泌有关.