同病异证H22肝癌小鼠HPA轴昼夜节律通路基因表达特征

摘要

目的 揭示同病异证H22肝癌小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)昼夜节律通路基因的表达特征.方法 采用小鼠计量化四诊和辨证方法筛选获得正常小鼠、早期邪毒壅盛证和气虚证肝癌小鼠,处死取其下丘脑、垂体和肾上腺.以GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术检测各组织的基因表达谱.重点分析3组织各自芯片中昼夜节律通路基因的表达特征.结果 肝癌发生后,同病异证肝癌小鼠昼夜节律通路基因在①下丘脑不同程度的表达下降,且以邪毒证为甚.其中气虚证的隐铬1(光解酶样)(Cry1)、阶段基因同源物1(果蝇)(Per1)、阶段基因同源物2(果蝇)(Per2)和核受体亚家族1/组D/成员1(Nr1d1)的表达明显高于邪毒组.②垂体的表达有高有低,但在两证候中表达高低趋势一致,表达下降基因中只有邪毒组的昼夜节律运动输出周期故障(Clock)基因下调明显,而表达升高基因中除气虚证的Per1外,其他均上调明显,且邪毒高于气虚.其中气虚组的Per1和Per2表达明显低于邪毒组.③肾上腺中的表达也有高有低,其中核心基因Clock和芳烃受体核转位因子样(Arntl)均明显下调(除邪毒证的Arntl),且以气虚证为甚.而其他基因的表达与本证候Clock和Arntl基因的表达趋势,以及其在两证候间的表达趋势均显示较差的一致性.其中气虚组的Clock和Per1明显低于邪毒组,而其Nr1d1明显高于邪毒组.以上Per1基因为HPA轴共有的证候特征性基因.结论 肝癌小鼠HPA轴的昼夜节律均不同程度受到影响,各组织的变化不仅与疾病本身有关,还具有明显的证候差异,其中Per1可能是HPA轴昼夜节律出现证候差异的关键基因.