舒肝健骨方与阿那曲唑联用对MG-63细胞BMP-2和Runx2 mRNA及蛋白表达的影响

摘要

目的 研究中药舒肝健骨方对人成骨肉瘤MG-63细胞骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨特异性转录因子(Runx2)基因表达和蛋白合成的影响,探讨其对骨合成代谢的影响机制.方法 MG-63细胞培养及传代,分组药物干预:对照组,阿那曲唑组,舒肝健骨方组,联合用药组,培养48 h后,抽提细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测BMP-2和Runx2 mRNA表达;提取细胞总蛋白,蛋白免疫印迹法检测蛋白合成的变化.结果 联合用药组和舒肝健骨方组BMP-2和Runx2 mRNA表达上调,2组BMP-2 mRNA相对表达量分别是对照组的1.65、2.34倍,Runx2 mRNA的相对表达量分别是对照组的1.41、2.33倍,差异有统计学意义,阿那曲唑组BMP-2和Runx2mRNA的表达下调.联合用药组、舒肝健骨方组BMP-2和Runx2蛋白的表达上升,BMP-2蛋白的相对表达量分别是0.75、1.01,Runx2蛋白的相对表达量分别是0.07、0.12,而阿那曲唑组二者的表达降低,与对照组比较虽无统计学意义,但与其余2组比较有统计学意义.结论 中药舒肝健骨方对骨合成代谢有促进作用,这可能是通过上调BMP-2及其下游特异性转录因子Runx2 mRNA的表达及蛋白合成而实现的.