外源性谷氨酸引发的内耳毛细胞损伤与支持细胞GLAST表达的相关性研究

摘要

目的观察外源性谷氨酸引发的内耳毛细胞损伤与支持细胞谷氨酸转运体(glutamate-aspartate transporter,GLAST)表达的相关性.方法将30只成年健康豚鼠随机分为3组,每组10只,经耳蜗钻孔,第一组动物左耳为对照组,给予人工外淋巴液(对照组);第二组动物左耳给予20 mmol/L谷氨酸(Glu组);第三组动物为正常组,不作特殊处理.采用听性脑干反应(ABR)测试、耳蜗铺片、硝酸银染色及免疫组织化学技术,观察Glu处理前后的听力学、形态学改变,以及引发的支持细胞GLAST的表达变化.结果给药后,三组豚鼠1 kHz ABR平均阈值分别为8.00±2.68、18.00±3.50、8.00±2.58 dB nHL;8 kHz分别为10.00±3.33、27.00±4.22、7.50±2.64 dB nHL;Glu组与对照组有显著差异(P<0.05).形态学改变:给予20 mmol/L谷氨酸3 d后,外毛细胞有较明显改变,出现错乱、缺失,内毛细胞出现形态改变,与听力学变化一致.免疫组织化学:正常组GLAST在支持细胞有表达,给予Glu后GLAST强阳性表达.结论谷氨酸对豚鼠内耳毛细胞具有毒性作用,GLAST参与外源性谷氨酸的转运,并受细胞外谷氨酸浓度的调控.