不同缺氧方法诱导皮质神经元表达缺氧诱导因子1α及促红素的实验方法比较

摘要

目的 研究不同缺氧方法刺激皮质神经元后细胞变化及HIF-1α、EPO的表达.方法 原代培养皮质神经元,分为正常对照组、环境缺氧组、氯化钴组和去铁敏组4组培养,CCK-8法检测细胞活力.应用western blot 方法检测HIF-1α及EPO蛋白的表达,RT-PCR分析其mRNA的表达.结果 不同的缺氧条件均能减低细胞活力,其中氯化钴组下降最明显.3组均可诱导HIF-1α及EPO蛋白表达:去铁敏组HIF-1α、EPO蛋白表达均高于氯化钴组(P<0.05).3组均能上调HIF-1α及EPOmRNA表达:去铁敏组、环境缺氧组与氯化钴组比较有明显升高(P<0.01).结论 不同缺氧方法均可以诱导皮质神经元表达HIF-1α、EPO蛋白和mRNA表达.去铁敏化学缺氧法是更为合适的皮质神经元缺氧研究的方法.