人羊膜间充质干细胞移植治疗帕金森病模型大鼠的疗效评价

摘要

目的 观察不同途径移植人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型大鼠的生物学效应及其在体内的分化.方法 采用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离hAMSCs,流式细胞术分析表型.40只雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、hAMSCs静脉移植组和原位移植组.采用单侧前脑内侧束(MFB)注射6-羟基多巴胺建立PD大鼠模型.通过舌下静脉或于MFB原位移植3 ×105个hAMSCs.腹腔注射阿朴吗啡诱导旋转观察大鼠的行为变化,免疫荧光染色法检测人细胞核抗原及神经元微管结合蛋白(microtubule-associated protein 2,MAP-2)的表达,免疫组化染色法检测酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)的表达.结果 与模型组比较,hAMSCs静脉移植组和原位移植组大鼠旋转次数均明显减少(均P＜0.05),前者行为学改善可持续至移植后6 w,后者则至8 w;免疫荧光染色显示,hAMSCs在原位移植区可存活至少12 w,并表达MAP-2;免疫组化染色显示静脉和原位移植hAMSCs均可上调PD模型大鼠黑质TH表达,但后者强于前者.结论 hAMSCs能改善PD模型大鼠的运动行为,原位移植优于静脉移植,其机制可能与上调黑质TH表达有关.hAMSCs可在原位移植部位分化为多巴胺能神经元样细胞.