均匀设计法优选肝豆汤的效应中药配伍——以TX小鼠神经细胞内Bcl-2、Bax蛋白表达水平及血清和脑组织中铜含量为指标

摘要

目的基于均匀设计法筛选中药复方肝豆汤保护TX小鼠神经细胞的效应中药。方法基于“6因子11水平表”均匀设计法，以神经细胞内Bcl-2、Bax蛋白表达水平及血清和脑组织中铜含量为指标，以TX小鼠为Wilson病动物模型，采用多元逐步回归分析法优选肝豆汤中6种药物（大黄、姜黄、黄连、泽泻、金钱草、三七）的效应中药配伍。采用Western blot法以及等离子质谱法分别测定细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和血清、脑组织铜含量。结果与对照组比较，TX小鼠脑组织中Bcl-2表达水平显著降低（P〈0．05），Bax蛋白表达水平显著升高（P〈0．05），脑组织铜含量显著升高（P〈0．05），血清铜含量显著降低（P〈0．05）。多元逐步回归分析结果显示，姜黄和大黄分别进入血清铜含量及脑组织铜含量的回归方程，黄连和泽泻均进入脑组织Bcl-2和Bax表达水平的回归方程，姜黄和金钱草分别进入神经细胞Bcl-2／Bax的回归方程，三七均未进入上述指标的回归方程。结论肝豆汤中大黄、姜黄、黄连、泽泻、金钱草配伍组合，可通过多靶点保护TX小鼠神经细胞；三七在保护TX小鼠神经细胞过程中未发挥明显效应。