拮抗链霉菌AFLP分析技术体系的研究

摘要

[目的] 探索基于AFLP的拮抗链霉菌DNA模板制备方法及其扩增体系,为AFLP技术在链霉菌乃至放线菌资源分析中的应用提供依据.[方法]以改进的CTAB法提取DNA,利用Pst Ⅰ/Mse Ⅰ型AFLP试剂盒及其反应体系进行扩增,采用5%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析扩增结果.[结果]提取了10个拮抗链霉菌菌株的基因组DNA,0.8%琼脂糖凝胶电泳检测显示其主带清晰,片段大小为37.64～40.86 Kb,无降解现象,亦无RNA残留;其OD260/OD280为1.625～1.833;Pst Ⅰ/Mse Ⅰ双酶切产物琼脂糖电泳呈弥散荧光长带,说明酶解充分;筛选出的3对引物对DNA模板的扩增谱带清晰,多态性丰富.[结论]该研究建立的DNA模板制备方法及其扩增反应体系可用于链霉菌的AFLP分析.