北仑河红树林内生放线菌分离、鉴定及活性研究

摘要

放线菌是天然抗生素的重要来源,是寻找天然抗感染活性产物的出发菌.为了分离广西壮族自治区北仑河红树植物内生放线菌,检测其抗菌活性及初步确定活性菌株的分类地位,本研究采集5种红树植物共15份样品,用14种液体培养基富集培养4周后,涂布于相应固体培养基进行分离纯化;以6种细菌和20株白色念珠菌(Candida albicans)为指示菌,采用点植法和滤纸片法对分离到的菌株进行抗菌活性检测;选取其中有抗菌活性的菌株进行16S rRNA基因测序,在属水平初步确定其分类地位.结果表明,共分离到菌株200株,其中从白骨壤(Avicennia marina)、秋茄(Kandelia candel)、红海榄(Rhizophora stylosa)、苦郎树(Clerodendrum inerme)和海漆(Excoecaria agallocha)中分别获得62、43、38、29和28株.根据培养和形态学特征初步剔除重复后得到106株,其中活性菌株52株,阳性率为49.1％,包括21株链霉菌属(Streptomyces)、26株拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)、2株假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)、2株壤球菌属(Agrococcus)和1株栖白蚁菌属(Isoptericola).其中菌株UMBR 1016和UMBR 1034与已知菌株Nocardiopsis alba DSM 43377T的相似度分别为98.27％和98.37％;菌株UMBR 1008与Nocardiopsis flavescens SA6T的相似度为98.36％,菌株UMBR 1028与Streptomyces pratensis ch24T的相似度为98.49％,这4株内生放线菌的相似度都低于98.6％,可能为拟诺卡氏菌属和链霉菌属的潜在新种.有38株对至少一株细菌有抑菌作用,35株对至少一株白色念珠菌有抑菌作用,阳性率分别达到35.8％和33.0％.广西北仑河红树植物内生放线菌资源丰富,抗菌活性较高,值得深入研究.研究结果将促进我国红树林植物资源的保护与红树植物内生放线菌药用资源的深入开发.