Calu-3细胞内琥珀酸脱氢酶活性及表达的双重染色法研究

摘要

目的:利用Calu-3细胞探讨肿瘤细胞琥珀酸脱氢酶活性及表达双重染色技术.方法:体外培养Calu-3细胞,将细胞爬片分为三部分,第一部分采用氯化硝基四唑氮蓝法对细胞进行琥珀酸脱氢酶活性染色,并分别孵育40 min、1h和2h.第二部分进行该酶的免疫组织化学染色.第三部分进行琥珀酸脱氢酶的组织化学和免疫组织化学的双重染色.在光学显微镜下观察并比较琥珀酸脱氢酶活性及表达染色结果的差异.结果:(①相比于孵育40 min和1h的细胞,孵育2h的细胞则反应更加充分,蓝紫色双甲臜颗粒明显增多.②免疫组织化学染色的细胞内出现黄棕色DAB颗粒.③在活性和表达双重染色中,孵育1h时蓝紫色双甲臜颗粒和DAB黄棕色颗粒较其他孵育时间的更加明显.结论:在Calu-3细胞中,琥珀酸脱氢酶活性染色时孵育2h效果较好,而在活性和表达双重染色中,孵育1h时染色效果最好.