陈山红心杉SCoT反应体系建立及引物筛选

摘要

研究采用正交设计及单因素相结合的方法建立优化陈山红心杉SCoT-PCR反应体系,并在此基础上进行引物筛选.结果表明:SCoT-PCR反应的最优体系(20.0μL)为:模板DNA 2.5μL(50.0 ng),2×Hieff PCR Master Mix 9.0μL,引物3.0μL(即浓度1.5μmol·L-1);并在此基础上从36条SCoT引物中筛选出14条扩增条带丰富明亮且多态性较强的引物.这为今后利用SCoT分子标记研究陈山红心杉遗传多样性、种质资源鉴定等提供基础.