黑曲霉缺失突变体菌株 ΔsodC的构建

摘要

为探究黑曲霉中的超氧化物歧化酶编码基因sodC在其抗氧化代谢方面所起的作用,构建得到黑曲霉缺失突变体菌株 ΔsodC.根据同源重组的技术原理,以黑曲霉基因组DNA为模板,扩增获得目的基因sodC的上下游侧翼片段,利用重叠序列对上下游片段进行PCR连接.将该片段与质粒pC3进行连接,并将其转入DH5α 感受态细胞,通过蓝白斑筛选及PCR鉴定,得到已构建成功的重组质粒.通过CaCl2/PEG转化法将重组质粒转入黑曲霉原生质体.通过多步骤的筛选及基因组DNA序列的检测,得到所需突变体菌株 ΔsodC以备后续研究使用.