中国人群PRKAG2心脏综合征新突变的PRKAG2基因的功能分析

摘要

目的 研究中国人群家族性传导系统异常伴心室预激及心肌肥厚患者新错义突变的PRKAG2基因表达和功能变化.方法 利用PCR扩增其功能区外显子片段,双脱氧末段终止测序法来构建表达PRKAG2 G100S、PRKAG2 R302Q及野生型(WT) PRKAG2基因的慢病毒载体,并对其从细胞学水平进行体外实验研究.结果 (1) PRKAG2 G100S和PRKAG2 R302Q突变对PRKAG2基因在CCL13细胞中的表达位置没有影响;(2) PRKAG2突变组CCL13/GS和CCL13/RQ与CCL13/WT组相比,PRKAG2蛋白表达量减少,且细胞质及胞核内有较多糖原沉积;(3)PRK AG2基因G100S和R302Q突变降低了CCL13细胞中的AMPK活性,而G100S突变降低AMPK活性的作用弱于R302Q突变(P＜0.05或P＜0.01).结论 PRKAG2 G100S突变是中国人PRKAG2心脏综合征家系的发病原因,初步证实了突变导致AMPK活性降低及糖原累积是家系的发病机制;G100S突变可能使PRKAG2基因Bateman结构域功能发生变化,但对Bateman结构域功能的影响弱于R302Q突变.