柚皮苷调控NF-κB信号通路缓解软骨细胞炎症损伤的作用机制研究

摘要

目的:观察柚皮苷对软骨细胞炎症损伤的影响,探索柚皮苷通过干预核因子(NF)-κB信号通路缓解软骨细胞炎症损伤的作用机制。方法:体外培养人软骨细胞,加入细胞培养板,分为正常组、模型组和柚皮苷低、中、高剂量组,除正常组外,其余各组细胞均使用脂多糖(LPS)诱导细胞损伤,柚皮苷各剂量组分别给予不同浓度的柚皮苷(2.5、5、10μmol/L)进行干预。使用cck-8(cell counting kit-8)法检测各组细胞活力,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测各组细胞上清中炎症介质白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot法)检测细胞内环氧酶(COX)-2、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、IκBα、p-IκBα、p65、p-p65蛋白的表达。结果:模型组软骨细胞活力较正常组明显降低(P<0.01),柚皮苷中、高剂量组软骨细胞活力明显高于模型组(P<0.01)。模型组软骨细胞上清中IL-6、TNF-α、NO、PGE2等炎症介质含量均明显高于正常组(P<0.01),柚皮苷各剂量组软骨细胞上述指标较模型组有不同程度的降低,以柚皮苷中、高剂量组降低更为明显(P<0.05,P<0.01)。模型组软骨细胞COX-2、i NOS蛋白表达明显高于正常组(P<0.01,P<0.05),p-IκBα/IκBα、p-p65/p65比值明显高于正常组(P<0.05,P<0.01);柚皮苷中、高剂量组软骨细胞上述指标水平或比值均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。柚皮苷各剂量对上述指标的改善作用均表现出一定的剂量依赖性。结论:柚皮苷可以缓解软骨细胞炎症损伤,其机制可能与调控NF-κB通路有关。