G蛋白信号转导调节因子通过抑制MAPK和NF-κB通路缓解脂多糖诱导的人膝骨关节软骨细胞炎症反应实验研究

摘要

目的:探究G蛋白信号转导调节因子(RGS1)对脂多糖(LPS)诱导软骨细胞炎症反应的影响及其潜在的机制.方法:LPS刺激正常人关节软骨细胞体外模拟炎症损伤.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测RGS1、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP-9 mRNA表达水平;免疫蛋白印迹法(Western blot)测定RGS1、一氧化氮合酶(i-NOS)、环氧化酶(COX-2)、p-ERK1/2、ERK1/2、p-p38、p38、p-JNK、JNK、NF-κB p-p65和NF-κB p65蛋白水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定NO含量、MMP-2和MMP-9蛋白水平.结果:LPS处理可抑制细胞活力,刺激炎症因子和金属蛋白酶的表达和释放,促进RGS1表达.敲除RGS1显著缓解LPS诱导的炎症损伤,抑制金属蛋白酶的表达和释放,磷酸化ERK和NF-κB.结论:RGS1沉默缓解LPS诱导的炎症反应和金属基质蛋白酶的表达和释放,这些作用可能是通过抑制了ERK和NF-κB通路的激活.