葡萄赤霉素合成关键基因VvGA20ox2的克隆、亚细胞定位和表达分析

摘要

本研究建立在对金手指葡萄果形转录组分析的基础上,通过分析样品间表达差异发现,与对照相比,GA20ox2基因的转录水平在GA3处理后有显著差异.为了进一步从分子水平阐述GA20ox2在赤霉素合成途径中的作用机理,本研究以金手指葡萄幼果为材料,克隆了GA20ox2基因,分析了此基因碱基序列特征,并通过构建融合表达载体对其进行亚细胞定位分析.研究结果表明,克隆了葡萄赤霉素合成途径中的VvGA20ox2基因,测序得CDS全长为1134 bp,编码377个氨基酸.VvGA20ox2编码的氨基酸序列与NCBI上其他物种GA20ox序列相似性在51％～67％,其中该基因与可可(EOX92603.1)和杨树(PNT28192.1)的亲缘关系较近.该基因定位在细胞核和细胞膜中.外源GA3处理后的成熟葡萄果实与对照相比纵径显著伸长,且在幼果中该基因表达量在一段时间内明显上升,推测VvGA20ox2基因可能参与葡萄果形拉长的调控.