抗鸡IgA单克隆抗体的研究Ⅲ.抗鸡IgMμ链单克隆抗体的制备及生物…

摘要

以亲和层析纯化的鸡ＩｇＭ免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为材料，取３次免疫后的脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ筛选抗鸡ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体以确定抗鸡ＩｇＭ重链特异性的抗体，获得了７株分泌抗鸡ＩｇＭμ链特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株．命名为Ｍ２、Ｍ４、Ｍ７、Ｍ９、Ｍ１０、Ｍ１１；和Ｍ１２。这７株杂交瘤细胞株连续传代６个月，并经液氮冻存５个月后复苏培养，仍能稳定地分泌特异性ＭｃＡｂ。７株ＭｃＡｂ均具有ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，腹水ＥＬＩＳＡ效价均在１０－５以上，其中Ｍ２、Ｍ４和Ｍ１０３株腹水效价高达１０－１０以上，最高者达到１０－１５。琼脂免疫扩散试验和ＥＬＩＳＡ交叉反应性试验测定表明，７株ＭｃＡｂ均与鸡ＩｇＭ呈阳性反应，与鸡ＩｇＧ呈阴性反应。用羊抗鸡ＩｇＭμ链抗血清进行ＥＬＩＳＡ阻断试验，结果表明，７株ＭｃＡｂ均是抗鸡ＩｇＭμ链的ＭｃＡｂ。