环境因子对黄鳝DMRT基因甲基化的影响

摘要

DNA甲基化是一种重要的 DNA 修饰方式，它能在不改变 DNA一级结构的情况下调控基因的表达，能够维持正常的细胞功能，在胚胎发育、遗传印记中起重要作用。以黄鳝为对象，采用限制性内切酶－PCR检测特定DNA片段是否发生甲基化的方法，研究不同温度、pH值、光照周期条件下DMRT基因在各组织中的甲基化差异。用甲基化敏感的限制性内切酶HpaⅡ酶切黄鳝的性腺、肾、脾、肝、肠等5个组织，根据已知的DMRT2、DMRT3、DMRT4基因序列设计特异的引物扩增酶切产物，并设置未酶切对照组，用1％琼脂糖检测，分析差异条带，若未酶切组泳道出现条带，酶切组泳道也出现条带则判定为阳性结果，否则判定为阴性结果。结果表明：不同生态因子条件下，在5个组织中DMRT2－FR2扩增序列中的位点均表现为阳性结果；DMRT3－FR2、DMRT4－FR2、DMRT4－FR3扩增序列中的位点均表现为阴性结果，说明这4个序列中位点的甲基化状态非常稳定，环境因子的小幅变化对其影响不大。