ACE2通过调节A549细胞中VEGF的表达抑制肺腺癌微血管形成

摘要

目的研究血管紧张素转换酶2（ACE2）在肺腺癌A549细胞微环境中通过血管内皮生长因子（VEGF）诱导肿瘤血管形成的发生机制。方法将过表达对照质粒（pcDNA3.1组）、ACE2过表达质粒（pcDNA-ACE2组）、干扰对照质粒（shRNA-NC组）及ACE2干扰质粒（shRNA-ACE2组）转染到肺腺癌A549细胞中, 48 h后提取细胞蛋白和上清液, 利用蛋白质印迹法和酶联免疫吸附测定分别检测细胞及上清液中VEGF的表达。用上述上清液培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）, 分为pcDNA3.1组、pcDNA-ACE2组、shRNA-NC组、shRNA-ACE2组及shRNA-ACE2+VEGF antibody组（向shRNA-ACE2组条件培养基加入0.5 mg/L的VEGF中和抗体）, 分别用MTT、细胞划痕实验、细胞侵袭实验和小管形成实验检测HUVECs的增殖、迁移、侵袭和小管形成能力。结果 pcDNA-ACE2组A549细胞及上清液中VEGF的表达量较pcDNA3.1组减少（P值均＆0.05）;shRNA-ACE2组A549细胞及上清液中VEGF的表达量较shRNA-NC组增加（P值均＆0.05）。pcDNA-ACE2组HUVECs的增殖率、迁移率、侵袭细胞数及小管总长度较pcDNA3.1组下降（P值均＆0.05）, shRNA-ACE2组HUVECs的增殖率、迁移率、侵袭细胞数及小管总长度较shRNA-NC组上升（P值均＆0.05）, shRNA-ACE2+VEGF antibody组HUVECs的增殖率、迁移率、侵袭细胞数及小管总长度较shRNA-ACE2组明显降低（P值均＆0.05）。结论 ACE2通过下调肺腺癌A549细胞微环境中VEGF的表达, 抑制肺腺癌血管内皮细胞的增殖、迁移、侵袭和小管形成能力, 抑制肺腺癌体外微血管形成。