Taqman探针-荧光定量PCR法检测HBVDNA的性能验证及评价

摘要

目的探讨适合本实验室的Taqman探针-荧光定量PCR法检测HBV-DNA的性能验证方法,评估其分析性能及其临床应用价值。方法采用卫健委临检中心室间质评参考物质、第三方质控品、和武汉大学中南医院收集的临床标本,按方法学性能评价指标设计验证试验,对检测结果的精密度、正确度、灵敏度、线性范围和干扰因素等参数进行性能验证。结果本检测系统批内精密度和批间精密度CV均小于<5%;正确度符合卫健委临检中心室间质评要求;检测灵敏度可以达到50 IU/mL,CV值≤20%;在5.90E+1 IU/mL^6.34 E+7 IU/mL浓度范围内,线性回归方程为Y=0.9833 X+0.0732,R^2=0.999;当血红蛋白≤23.5 g/L、胆红素≤450μM、三酰甘油≤22.5 mM时,检测结果未受干扰。结论经验证,该荧光定量PCR检测系统检测HBV-DNA的性能指标满足临床预期要求,常规应用结果满意;荧光定量PCR的性能验证是保证其检验质量的必要手段,形成适合的验证方案流程将会对临床基因扩增检验的标准化和规范化起到重要作用。