Sulforaphane抑制热灭活大肠杆菌诱导的HeLa细胞凋亡

摘要

目的 研究Sulforaphane（SFN）对细胞凋亡的抑制作用及其在脓毒症中对细胞的保护作用。方法 将HeLa细胞分为4组：对照组、热灭活大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）处理组、SFN处理组（SFN组）和热灭活E.coli ＋SFN组。酶联免疫反应检测炎症因子白细胞介素（interleukin,IL）-1β和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α；流式细胞术（annexin V /propidium iodide双染）检测细胞凋亡；免疫荧光检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量及线粒体膜电位的变化；Western blot检测活化的caspase 3、bax和bcl-2水平。结果 热灭活E.coli处理后,细胞产生的炎症因子IL-1β[（121.13±8.44） pg/mL比（36.67±5.82） pg/mL,P＆0.05]和TNF-α[（123.83±7.32） pg/mL比（20.63±1.91） pg/mL,P＆0.05]明显升高、凋亡细胞数明显增加[（32.49±3.96）%比（12.52±1.37）%,P＆0.05]、活化的caspase 3[（2.28±0.19）比（1.01±0.19）,P＆0.05)]和BAX[（4.81±0.80）比（1.04±0.25）,P＆0.05)]水平明显升高,而bcl-2[（0.27±0.08）比（0.96±0.18）,P＆0.05)]水平明显降低。用SFN处理后（包括SFN组、热灭活E.coli ＋SFN组）,IL-1β[（45.41±13.16） pg/mL比（121.13±8.44） pg/mL,P＆0.05],TNF-α[（30.3±6.0） pg/mL比（123.8±7.3） pg/mL,P＆0.05]水平明显降低、凋亡细胞明显减少[（11.34±2.05）%比（32.49±3.96）%,P＆0.05]、活化的caspase3[（1.01±0.07）比（2.282±0.19）,P＆0.05)]、BAX[（2.15±0.14）比（4.81±0.80）,P＆0.05)]明显减少,而bcl-2[（1.34±0.18）比（0.27±0.08）,P＆0.05)]水平明显增加。与此相对应,与灭活E.coli处理的细胞相比较,加入SFN（包括SFN组和热灭活E.coli ＋SFN组）,ROS水平明显下降[（1.27±0.17 ）比（6.30±1.50）,P＆0.05)],而线粒体膜电位明显上升[（1.18±0.10）比（0.14±0.01）,P＆0.05)]。结论 SFN可有效抑制热灭活E.coli诱导的HeLa细胞调亡、稳定线粒体膜电位、降低ROS、抑制炎性因子的产生。因此,SFN可能作为脓毒血症时保护细胞的药物。