麻疹减毒活疫苗细胞工厂多次收获工艺探索

摘要

目的 建立麻疹减毒活疫苗细胞工厂多次收获工艺.方法 采用细胞工厂培养2BS细胞,以不同感染复数接种麻疹病毒,绘制病毒生长曲线以确定适宜感染复数.在感染后不同时间点,微量滴定法比较仅收获胞外病毒与收获胞内外病毒的滴度.比较单次收获与多次收获病毒的滴度,并对原液和冻干成品进行稳定性试验.结果 确定细胞工厂培养麻疹病毒的适宜感染复数为0.010～0.100.感染后108～168 h细胞外病毒滴度与含胞内病毒滴度无明显差异(t = 0.524,P＞0.05).多次收获得到的病毒总量高于单次收获.单次收获与多次收获得到的病毒原液-65°C保存3个月,病毒滴度下降均不超过每毫升0.3 lg半数细胞物培养感染量,冻干成品37°C保存1周,滴度下降均不超过每毫升0.5 lg半数细胞培养物感染量.结论 建立了细胞工厂培养麻疹减毒活疫苗的多次收获工艺.