益肺温阳化浊汤调控PI3K/Akt-mTOR信号通路保护AD大鼠神经细胞的作用机制研究

摘要

目的 探讨中药复方益肺温阳化浊汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠模型调控PI3 K/Akt-mTOR信号通路、保护AD大鼠神经元的作用机制.方法 选取SD大鼠120只,随机分为假手术组、模型组、对照组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组,每组大鼠20只.采用β-淀粉样蛋白1-40(Aβ均1-40)制备AD大鼠模型.采用Real-time PCR、Western Blot等方法检测PI3 K/Akt-mTOR通路及其下游自噬与凋亡相关因子的mRNA和蛋白表达水平,观察益肺温阳化浊汤灌胃对AD模型大鼠海马区PI3 K/Akt-mTOR信号通路相关因子及Aβ含量的影响;探讨益肺温阳化浊汤治疗AD的作用机制.结果 对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠定位航行试验逃避潜伏期、平台象限游泳距离、非平台象限游泳距离、平台象限游泳时间、非平台象限游泳时间、跨越原平台次数均显著优于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).假手术组大鼠的海马组织神经细胞凋亡率及Aβ含量均低于其他5组,模型组高于其他用药4组,差异有统计学意义(P＜0.05).六组大鼠海马组织的神经细胞凋亡率表现为模型组＞低剂量组＞对照组＞中剂量组＞高剂量组＞假手术组,海马组织Aβ含量表现为模型组＞低剂量组＞中剂量组＞对照组＞高剂量组＞假手术组.大鼠脑组织中PI3K、Akt、Beclin1、LC3蛋白表达水平均表现为模型组＞对照组＞低剂量组＞中剂量组＞高剂量组,mTOR水平表现为模型组＜对照组＜低剂量组＜中剂量组＜高剂量组＜假手术组.与假手术组大鼠比较,模型组大鼠脑组织中PI3K、Akt、Beclin1的mRNA表达水平显著升高,mTOR的mRNA水平显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组大鼠比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组及对照组大鼠脑组织的PI3K、Akt的mRNA表达水平均明显降低,mTOR的mRNA表达水平均明显升高;低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠脑组织的Akt的mRNA水平显著低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 益肺温阳化浊汤灌胃可通过调控PI3K/Akt-mTOR信号通路,调节AD模型大鼠自噬系统,清除神经细胞Aβ,抑制神经细胞凋亡,发挥保护神经细胞的作用.