黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因在甲醇毕赤酵母中的表达

摘要

将编码黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶(lip)的cDNA克隆到酵母整合型质粒pME-TA上,电转化Ade缺陷型甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)PMAD16,通过MD平板及PCR方法筛选和鉴定重组子.重组子发酵液经SDS-PAGE分析和木质素过氧化物酶活力测定等方法鉴定,表明带自身信号肽的黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(lip)在甲醇毕赤酵母中得到表达.优化其发酵培养条件,以藜芦醇为底物进行酶活测定,其酶活可达932U/L.相应发酵指数为12.94U/h·L.比出发菌株提高了24.18%.