信号肽对短杆菌胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响

摘要

从Brevibacterium sp. DGCDC-82染色体DNA中扩增出含信号肽序列的胆固醇氧化酶结构基因,插入大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a-COD(s+).以pET28a-COD(s+)为底物,扩增出不含信号肽的胆固醇氧化酶结构基因,构建成重组质粒pET28a-COD(s-).两种重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)通过IPTG诱导均获得活性表达,SDS-PAGE分析,目的产物表达量都占到了细胞总蛋白的50%以上, Brevibacterium sp. DGCDC-82胆固醇氧化酶的信号肽对重组酶的空间构象和表达量并没有太大的影响.