特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应

摘要

为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERTmRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA.以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12 h、24 h、48 h、72 h和5 d,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中hTERT mRNA的表达.与对照组相比,4段siRNA中有3段在转染后12 h即对hTERT mRNA的表达产生抑制,48 h抑制率最高,72 h后下降,其中位于hTERTmRNA二级结构中的结构相对简单区域的siRNA抑制率最高,达到75%,说明特异性siRNA对hTERT基因有明显的抑制效果,且该抑制效应具有位置及时间依赖性.