地西泮代谢物的结合物水解条件研究

摘要

目的:考察β-葡萄糖醛酸苷酶水解尿液中地西泮代谢物的结合物的酶解条件.方法: 实验设计采用正交表L9(34).取尿样2 mL,加内标,再加不同量的β-葡萄糖醛酸苷酶,在不同温度、不同酶解时间下水解,然后用正己烷-二氯甲烷(5∶3)5 mL提取,挥干提取液后用50 μL甲醇溶解,10 μL进样,采用高效液相色谱法检测.结果:对水解产物峰面积与内标物峰面积的比值进行方差分析,发现水解尿液中去甲地西泮、替马西泮、奥沙西泮的葡萄糖醛酸苷结合物的最佳酶解条件分别为55℃,5 h,5 000 U酶量;55℃,2 h,1 000 U酶量;55℃,2 h,5 000 U酶量.结论:水解2 mL尿液中地西泮代谢物的结合物的最佳条件为55℃,5 h,5 000 U酶量.