酶水解

摘要： 研究了一种AlCl_(3)辅助的低共熔溶剂(DES)预处理毛竹的方法。合成了以氯化胆碱和AlCl_(3)为氢受体,愈创木酚为氢供体的低共熔溶剂,考察了低共熔溶剂中AlCl_(3)用量对毛竹原料的化学组成、物料得率和后续酶水解效率的影响,结果表明:随着AlCl_(3)用量的增加,预处理物料木聚糖和木质素含量逐渐降低,葡聚糖含量升高,葡聚糖酶水解得率显著提高。当AlCl_(3)用量为1.32%(摩尔分数),氯化胆碱、愈创木酚和AlCl_(3)物质的量比为25∶50∶1)时,预处理效果达到最佳,预处理物料得率为57.16%,葡聚糖和木聚糖回收率分别为95.95%和12.84%,木质素脱除率为74.88%,葡聚糖酶水解得率由未添加AlCl_(3)时的11.16%提高到96.20%,表明AlCl_(3)可以有效促进DES体系对毛竹中木聚糖和木质素的溶解。通过XRD、SEM和FT-IR分析对预处理后物料进行表征。XRD分析结果表明预处理物料的结晶度随着AlCl_(3)用量的增加逐渐增加,主要是由于木质素和木聚糖组分逐渐被脱除,而纤维素组分无明显破坏;SEM分析结果发现预处理后物料纤维出现碎片化和团聚现象,随着AlCl_(3)用量的增加原料组分被逐渐溶解和破坏;FT-IR分析结果也进一步证明,预处理后的物料中纤维素含量的增加,伴随着木聚糖和木质素含量逐渐减少。

摘要： 谷物(如大米、高粱、大麦、小麦、小米、玉米和荞麦等)在人类食物中占很大比例,是人类获取能量的主要来源。谷物蛋白在谷物中含量非常丰富,作为谷物蛋白的初级水解产物,谷物源活性肽不仅具有良好的消化吸收性,还具有多种生理活性。其中抗氧化活性是谷物源多肽的重要活性功能。该文对谷物源抗氧化肽的来源和制备方法进行总结,对谷物源抗氧化肽构效关系研究及在不同领域中的应用现状进行了综述,以期为谷物源抗氧化肽的进一步开发提供参考。

摘要： 近年来,低共熔溶剂(deep eutectic solvent,DES)以易制备、成本低、易回收等优势,在生物质预处理方面受到广泛关注。本研究以氯化胆碱为氢键受体,乙醇胺为氢键供体,合成DES,研究了不同温度、时间和固液比预处理条件对中药渣组分和酶解效果的影响。结果表明:固液比1∶20、120°C、预处理4h后原料中木质素去除率达到78.42%,纤维素回收率为83.89%。随后对不同条件下所得底物进行酶水解,反应96h后发现,较优条件下所得底物酶解效率为78.57%,较未处理中药渣(30.40%)提高了1.58倍。类分形动力学分析表明,预处理温度对酶解效果影响最大。SEM、XRD和FTIR检测发现,预处理后底物形貌、结晶指数和官能团变化有利于酶解效果的提高。

摘要： 合成两种新型三元低共熔溶剂:氯化胆碱/乙二醇/对羟基苯磺酸和氯化胆碱/1,4-丁二醇/对羟基苯磺酸,分别对杨木进行预处理。采用成分分析、红外光谱、X-射线衍射及扫描电镜等对预处理前后杨木的化学成分、结构及表面形貌的变化规律进行分析,研究低共熔溶剂的氢键供体种类及预处理时间对杨木成分及后续酶水解的影响。成分分析及红外光谱分析结果表明,氯化胆碱/乙二醇/对羟基苯磺酸及氯化胆碱/1,4-丁二醇/对羟基苯磺酸均可在短时间内(0.5~1.5 h)脱除大量木聚糖(>74%)和木质素(>70%),同时保留绝大部分纤维素(>74%)。X-射线衍射仪分析表明,预处理后杨木纤维素晶型仍为纤维素Ⅰ_(β),但结晶度上升。扫描电镜结果显示,样品表面粗糙度增加。酶水解结果表明,延长处理时间及增长氢键供体碳链均可促进纤维素酶水解,24 h酶解效率最高超过95%。因此,氯化胆碱/多元醇/对羟基苯磺酸体系可显著提高杨木的酶水解效率,是一种短时、高效的预处理体系,有望应用于开发低能耗的木质纤维素加工工艺。

摘要： 本实验研究运用纤维素酶水解桑葚原料浆液,通过酶解pH值、底物浓度、酶水解时间及纤维素酶添加量等因素,得到最优条件下生产桑葚饮料的配方,大大提高了纤维素酶酶解的作用效率。实验结果表明:当纤维素酶(纤维素酶活为10000U/g)添加量为100U/g、底物浓度2.5%、溶液pH值5.0左右、温度控制在50°C、反应时间达1.5h条件下,此时桑葚汁浸提得率达最大值,为9.2%;实验研究还得到了该饮料的最适配方:当制得的桑葚汁物质浓度为70%(其中固体桑葚含量为0.34%),加入0.1mol/L柠檬酸4%,蔗糖6%,羧甲基纤维素钠0.4%,冰糖雪梨香精0.02%,再进行热灌装和巴氏杀菌等一系列处理与调配可制得口感丰富、营养美味、酸甜可口的桑葚饮料。

摘要： 以慈竹为原料,研究了甲醛/二氧六环预处理对竹材纤维素酶水解糖得率的影响,并探索了酶水解液发酵生产乳酸工艺。研究结果表明:该预处理可以脱除木质素,大幅提高预处理得到的底物中纤维素的含量,纤维素质量分数可达75.6%~90.7%;预处理后底物酶水解的葡萄糖最高得率为92.8%;酶水解液可以直接用于发酵生产乳酸,葡萄糖转化为乳酸得率可以达73.2%。借助扫描电子显微镜(SEM)、X射线衍射(XRD)仪和离子色谱仪等手段分析预处理前后竹材结构的变化情况,发现预处理后竹材表面卷曲,蜡质几乎被完全溶解脱除,结构疏松。

摘要： 以杨木为原料,采用低共熔溶剂(DES)协同酸性二氧六环进行预处理,研究盐酸浓度、预处理时间和预处理温度对杨木酶水解特性的影响。结果表明,当盐酸质量分数为1%,反应温度为110°C,时间为70 min时,酶水解得率为69.75%,纤维素保留率为73.66%、半纤维素和木质素脱除率分别为72.61%和48.71%。协同预处理在保留纤维素的同时,可显著提高杨木中半纤维素和木质素的脱除率。同时,预处理能够大大提高杨木的结晶度,破坏杨木的致密结构,影响其热稳定性,进而有效提高纤维素酶水解得率。

摘要： 采用过氧化氢-乙酸(HPAC)对甘蔗渣(SCB)进行了联合预处理。以预处理后的甘蔗渣为原料,先进行酶水解,然后将水解液进行乙醇发酵,探讨预处理对甘蔗渣酶解和发酵的影响。实验结果表明:20 g甘蔗渣,加入150 mL过氧化氢水溶液(75 mL过氧化氢(30%)和75 mL水)和150 mL乙酸(99%),硫酸用量为过氧化氢-乙酸溶液体积的0.5%,在70°C反应2 h时,HPAC预处理脱除了88.85%的木质素,并使90.10%的纤维素保留在底物中。底物(HPAC/70-SCB-0.5)的酶可及度是80.30 mg/g,与相同条件下单独过氧化氢预处理(HP/70-SCB)和单独乙酸预处理(AC/70-SCB)相比,分别增加了38.26%和31.08%,甘蔗渣木质素的表面覆盖率从原料的0.66降低至0.22。酶解上清液在酶用量为5 FPIU/g(以底物计)条件下水解后,葡萄糖得率是87.63%,分别是HP/70-SCB和AC/70-SCB的6.89和20.62倍,发酵产乙醇质量浓度是7.57 g/L,分别是HP/70-SCB和AC/70-SCB的7.65和22.94倍。

摘要： 研究酸性水溶助剂对甲苯磺酸(p-TsOH)对竹屑组分分离及制备单糖、木质素纳米颗粒和糠醛的影响。通过扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、红外光谱(FT-IR)对竹屑分离前后物理化学结构进行分析,采用透射电镜(TEM)对木质素纳米颗粒进行分析。研究结果表明:在p-TsOH质量分数为55%、温度90°C和120 min条件下,木聚糖和木质素去除率分别为82.72%和82.16%,而纤维素保留率高达87.3%,预处理物料酶解72 h的葡萄糖得率达96.4%;预处理后分离得到的滤液采用缓慢加水稀释沉淀法得到木质素纳米颗粒(平均粒径为69.33 nm)后,再采用真空蒸发浓缩后于170°C、5 min下反应制备糠醛,糠醛得率为78.5%。物料衡算结果表明:1000 g绝干竹屑可以得到426.6 g可发酵性单糖(其中葡萄糖390.9 g,木糖35.7 g),217.1 g木质素纳米颗粒和85.4 g糠醛。

摘要： 以碱处理后甘蔗渣为研究对象,考察了不同物料混匀方式、添加3种低共熔溶剂(DES)、分批补料的进料方式、添加半纤维酶对高浓度底物酶解效率的影响。结果显示:磁力(机械)搅拌能够加快酶解速率,但对提高酶解效率作用较小;低浓度DES的添加对酶解的影响几乎可以忽略;分批补料底物初始质量浓度为150 g/L,分别在12 h、 36 h补料100 g/L,使底物总质量浓度达到350 g/L,酶解96 h后,总糖质量浓度达到162.7 g/L,纤维素和半纤维素酶解率均为51%左右;在分批补料基础上,添加1 000 IU/g的半纤维素酶,利用复合酶进行酶解96 h,总糖质量浓度达到218.9 g/L,纤维素和半纤维素酶解率分别为72%和63%,较未添加半纤维素酶时提高了40%和22%。

摘要： 探讨了Mg(OH)2预浸渍联合联合盘磨预处理对桉木酶水解效率的影响.结果表明:当浸渍阶段Mg(OH)2用量为5％时,盘磨预处理能耗较单纯盘磨预处理时降低了53.54％(约560kWh/t),预处理原料的酶解效率可高达91.53％.由于Mg(OH)2的微溶性和弱碱性,Mg(OH)2预浸渍联合盘磨预处理对原料的物理结构影响较大,产生较多的细小组分和纤维碎片,提高了原料比表面积,有效破坏纤维细胞壁的结晶结构,测得纤维物料预处理后结晶度降低.

摘要： 为了确定基因工程改造的靶点，有效地提高酶制剂的生产效率。本课题组深入探讨了纤维素酶和半纤维素酶生产菌株(丝状真菌)的蛋白(纤维素酶)合成代谢调控网络和关键基因，特别是和碳分解代谢物阻遏作用机制相关的代谢途径和基因，揭示了蛋白质的修饰调控了纤维素酶的转录水平且显著影响了纤维素酶的合成。并人工构建了丝状真菌的合成生物学元件，改造了纤维素酶生产菌株，提高了纤维素酶的产量。为了降低纤维素酶和半纤维素酶的用量，本课题组研究了酶水解过程中预处理物料的粒了径分布以及反应体系中金属离了和酶水解效率的关系，并提出了有效的解决方案。最后，本文将介绍酶糖化技术在利用工业废弃物-玉米芯废渣生产液体燃料及化工产品工艺的应用案例。

摘要： 绿液的主要化学成分是Na2CO3和Na2S,可在硫酸盐浆厂碱回收系统中循环产生.毛竹具有可再生性强、生长周期短的特点,是生产生物乙醇的重要潜在原料之一.本文主要研究了在不同总用碱量(TTA)和温度的条件下绿液预处理对毛竹的化学成分及酶水解的影响.随着预处理用碱量和温度的提高,木质素的脱除率上升,但同时也加剧了碳水化合物的降解.预处理后的浆料用Cellic(R) CTec2复合酶进行酶水解,随着预处理用碱量和温度的提高,各聚糖转化率上升.本试验优化得到绿液预处理毛竹最优条件:最高温度160°C,用碱量16％,硫化度25％,保温1h.当酶用量为40 FPU/g(相对纤维素)时,葡聚糖、木聚糖和总糖的转化率分别为64.9％,48.0％和58.1％.此时木质素的脱除率为44.6％,浆料的得率为68.3％.

摘要： 本研究利用离子液体1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐([C2mim] [OAc])将纤维素和木质素进行重构,考察纤维素结晶度和木质素含量对酶水解的影响.研究表明,本研究提出的考察方法中木质素对酶水解的影响与传统考察方法(向纤维素酶水解体系中添加木质素)中发现的机制不同.重构样品中纤维素结晶度轻微变化对酶水解的影响很小.用离子液体预处理生物质原料时,预处理后样品中木质素的含量对纤维素的酶水解的影响很小,而相应纤维素的结晶晶型由纤维素Ⅰ型变为纤维素Ⅱ型对纤维素的酶水解有很大的促进作用.

摘要： 由于稀有人参皂苷与某些高含量人参皂苷相比,只是糖基数目不同.因此,可以采用酶水解人参皂苷制备稀有人参皂苷.而稀有人参皂苷可以被乙酰氨基化,以增强其药理活性.实验采用蜗牛酶,转化人参皂苷Rd制备稀有人参皂苷C-K.转化产物C-K与N-乙酰-D-氨基葡萄糖反应,采用高效液相色谱法和电喷雾质谱检测法,对反应产物进行检测.结果表明,二醇型人参皂苷Rd经蜗牛酶转化,生成稀有人参皂苷C-K,C-K被乙酰氨基化后,得到含有N-乙酰氨基葡萄糖的人参皂苷化合物.

摘要： 利用正交试验法对NaOH-Fenton反应预处理巨龙竹竹粉的条件进行优化,得到的最佳预处理条件为:每克稀碱预处理后竹粉底物加入质量分数为30％的H2O2溶液4mL,Fe2+浓度6mmol/L,反应时间24h,获得的72h酶水解得率为54.96％.巨龙竹原料经NaOH-Fenton预处理后,纤维素相对含量增加,半纤维素和木质素相对含量降低,72h酶水解得率大大提高.利用红外光谱和热重分析对原料、NaOH预处理、NaOH-Fenton试剂预处理的巨龙竹的化学性质及热稳定性进行分析.结果表明,NaOH-Fenton预处理破坏了木质纤维原料的结构、改变化学性质,并且物料经预处理后热稳定性越来越高.

摘要： 超高压对蛋白质一级结构没有影响,不利于二级结构的稳定,对三级结构有较大的影响,而四级结构对压力非常敏感.超高压处理主要是破坏构成蛋白结构的三级、四级结构非共价键,而对共价键影响很小.蛋白质三级结构是形成酶活性中心基础,超高压作用导致三级结构崩溃时,使酶括性中心氨基酸组成发生改变或丧失活性中心,从而改变其酶催化活性.超高压处理会使蛋白分子解聚成亚基单元,使暴露极性基团增多,水化作用增强,从而有效提高其溶解性.蛋白溶解度随压力增大而增大,在0～100MPa时溶解度变化最大,但在到达120MPa后,均质压力再增大,蛋白溶液的溶解度的变化不明显.蛋白溶液的乳化性和乳化稳定性在不同均质压力下变化不大,甚至有降低的趋势了.超高压处理可使豆浆和大豆分离蛋白溶液凝胶性能均有所改善,所形成凝胶持水性高、细腻.酶水解结合超高压处理有可能会提高蛋白功能性质,若处理条件得当,还会产生较多生物活性肽.但由于蛋白质超高压-酶解研究仅在近年才被予重视,研究尚不系统和深入,且对超高压条件下酶解过程中蛋白质结构变化规律和酶解产物生成规律研究尚属空白,超高压-酶解反应机理也尚不清楚,也未见关于超高压条件下蛋白质酶水解动力学文献报导,相信在不久将来,有关该领域将会成为人们研究热点.超高压处理可使部分游离氨基酸特别是对肉的香味有重要作用的几种游离氨基酸如丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸和蛋氨酸的含量增加.但是,当温度加热到一定程度时,一些氨基酸会遭到破坏甚至损失,尤其是一些含硫氨基酸.

摘要： 用FeCl3溶液预处理蔗渣,运用Box-Behnken Design (BBD)设计,考察预处理的影响因子分别为:FeCl3预处理保温时间、反应温度、FeCl3浓度以及表面活性剂吐温80添加量,并对预处理蔗渣进行纤维素酶水解糖化.不同预处理条件对蔗渣各组分溶出及后续酶解产生显著影响.用傅立叶红外光谱(FTIR)分析了预处理前后化学结构变化.实验结果显示氯化铁溶液预处理能十分有效提高蔗渣酶解糖化效果,以总的葡聚糖产率为响应值优化预处理条件,得出较佳的预处理条件为:氯化铁浓度为0.05mol·L-1,吐温80用量1.00％ (w/v),保温温度为180°C,保温时间为60min.

摘要： 稻草秸秆在150、160°C及4%16％用药量的条件下,用亚硫酸钠-甲醛预处理,并通过对浆料进行酶解,测定酶解液中总糖得率来评价预处理效果.结果表明,原料蒸煮得率随亚硫酸钠用量的提高而下降.同等条件下,温度对蒸煮得率的影响不大,且低温减少浆料中多聚糖的降解.实验还表明,亚硫酸盐-甲醛预处理有较强的脱木质素选择性,能够保留较多的纤维素.在亚硫酸钠用量12％,160°C保温1h的条件下,总糖回收率高达80％,说明亚硫酸钠-甲醛蒸煮能够有效地对稻草进行酶解糖化前的预处理.

摘要： 阻碍木质纤维素类生物质转化为能源、材料或高附加值化学品的关键瓶颈问题是缺乏经济高效的生物质预处理技术及各组分的高效转化.文章介绍了一种双螺旋挤压预处理技术,在高浓(约35％)低温(小于100°C)低用碱量(NaOH用量6％)的条件下处理玉米秸秆,木质素脱除率为71％;预处理后秸秆在纤维素酶用量20PFU/g底物、木糖酶用量5IU/g底物的条件下,水解48h后,葡聚糖水解效率83％,总糖得率78％.分离出的木质素氧化磺化反应后可以作为混凝土减水剂,此减水剂添加量为0.3％时,水泥净浆流动度185mm.水解液使用丙酮丁醇梭菌ATCC824发酵,总糖转化率92.7％,ABE总产率为112kg/t玉米秸秆.

摘要： 本发明属于酶学工程技术领域，具体涉及的是一个属于糖基水解酶家族3的β‑木糖苷酶在水解玉米芯木聚糖中的应用。本发明从鞘氨醇单胞菌ATCC31461中克隆到一个β‑木糖苷酶基因spbgl4，将其与克隆表达载体pSE380连接后，转化至大肠杆菌XL1‑Blue中诱导表达，对目的蛋白进行镍亲和层析纯化，纯化得到的SPBGL4蛋白质能够单独水解玉米芯木聚糖，只有单一的水解产物‑木糖，对玉米芯木聚糖的酶解得率达到62.8％。本发明的β‑木糖苷酶SPBGL4在木糖制备中具有重要的工业应用潜力。

摘要： 本发明涉及琼胶寡糖水解酶及一种通过利用该琼胶寡糖水解酶从琼脂糖中生成3,6‑脱水‑L‑半乳糖和半乳糖的方法。更具体地，通过使用对琼脂三糖具有水解活性的β‑琼胶寡糖水解酶，提高来自琼脂糖中的3,6‑脱水‑L‑半乳糖和半乳糖的产率，即糖化率。

摘要： 本发明公开了一种氧化水解酶基因及其编码的氧化水解酶的制备与应用。本发明所涉及的氧化水解酶BtLPMO10A基因来源于苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(ACCC 10066)。本发明还提供了一种制备氧化水解酶BtLPMO10A的方法，即利用基因工程的技术方法，将该酶的基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该工程菌株表达制备的氧化水解酶BtLPMO10A对不溶性几丁质具有较强的结合能力，可氧化水解多糖物质产生具有不同聚合度的糖酸。本发明提供的氧化水解酶BtLPMO10A可辅助多糖水解酶，提高多糖的水解效率。

摘要： 本发明公开了一种氧化水解酶基因及其编码的氧化水解酶的制备与应用。本发明所涉及的氧化水解酶BtLPMO10B基因来源于苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(ACCC 10066)。本发明还提供了一种制备氧化水解酶BtLPMO10B的方法，即利用基因工程的技术方法，将该酶的基因克隆到大肠杆菌表达载体上，获得可表达该酶的大肠杆菌重组菌株，用该工程菌株表达制备的氧化水解酶BtLPMO10B对不溶性几丁质具有较强的结合能力，可氧化水解多糖物质产生具有不同聚合度的糖酸。本发明提供的氧化水解酶BtLPMO10B可辅助多糖水解酶，提高多糖的水解效率。

摘要： 本发明的课题在于提供一种高活性的纤维二糖水解酶。通过将作为从序列号1所示纤维二糖水解酶的N末端起第62位氨基酸的天门冬酰胺、或者在与所述纤维二糖水解酶具有同源性的纤维二糖水解酶的氨基酸序列中的对应于该位置的天门冬酰置换为丙氨酸，可以提高纤维二糖水解酶的活性。

摘要： 本发明涉及用于从昆虫生产壳多糖和/或脱乙酰壳多糖的方法。更具体地，本发明涉及用于从昆虫角质层生产壳多糖和/或脱乙酰壳多糖的方法，其包括昆虫角质层压榨步骤，随后为涉及使用蛋白水解酶将昆虫角质层酶促水解的步骤，所述角质层在酶促水解前已经使用氧化剂处理。

摘要： 本申请属于生物技术领域。本申请提供了一种胆盐水解酶基因工程菌、胆盐水解酶及其应用。胆盐水解酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，胆盐水解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过胆盐水解酶的编码基因构建了表达胆盐水解酶的重组载体质粒，并通过大肠杆菌诱导表达，得到的胆盐水解酶基因工程菌具有很好的蛋白表达能力，表达的胆盐水解酶能够用于催化分解或合成N‑酰基氨基酸表面活性剂，且催化能力强、酶活稳定性好，有潜力开发为合成氨基酸表面活性剂的生物催化剂。

摘要： 本发明公开了一种复合水解酶，是厌氧菌Aspergillus oryza所分泌的胞外蛋白酶、α‑淀粉酶和脂质酶三者的混合复配物，三者的混合质量比为(5～10):(5～10):(1～2)。所述复合水解酶应用于污泥脱水调理的技术方法，将复合水解酶干粉加入30～40°C水中搅拌3～5h以配制复合水解酶的储备液(质量浓度2～5wt.％)；向待调理污泥加入上述复合水解酶储备液，使得复合水解酶最终投加量为待调理污泥干基质量的0.5～1％；在特定反应温度(20～30°C)和污泥初始pH值(6～11)的条件下密闭孵育10～20h，过程中施以100～300rpm磁力搅拌，充分反应后即可实现污泥脱水性能的有效提升，污泥毛细吸水时间大幅降低。

摘要： 本发明涉及一种耐热琼脂水解酶和使用此耐热琼脂水解酶的单糖制备方法。更具体来说，在本发明中，耐热琼脂水解酶可用于通过有效地分解琼脂糖或琼脂来以高产率制备半乳糖和3，6‑脱水‑L‑半乳糖，而无需化学预处理、中和过程或琼胶三糖水解酶处理过程。

摘要： 本发明属于酶学工程技术领域，具体涉及的是一个属于糖基水解酶家族3的β‑木糖苷酶在水解玉米芯木聚糖中的应用。本发明从鞘氨醇单胞菌ATCC31461中克隆到一个β‑木糖苷酶基因spbgl4，将其与克隆表达载体pSE380连接后，转化至大肠杆菌XL1‑Blue中诱导表达，对目的蛋白进行镍亲和层析纯化，纯化得到的SPBGL4蛋白质能够单独水解玉米芯木聚糖，只有单一的水解产物‑木糖，对玉米芯木聚糖的酶解得率达到62.8％。本发明的β‑木糖苷酶SPBGL4在木糖制备中具有重要的工业应用潜力。