miR-92a靶向调控STARD13表达促进前列腺癌DU145细胞侵袭和迁移的实验研究

摘要

目的 探讨miR-92a对前列腺癌DU145细胞侵袭和迁移的影响及其机制.方法 将转染miR-92a mimics、miR-92a inhibitor及其阴性对照的细胞分别标记为miR-92a mimics组、miR-92a inhibitor组、mimics-NC组和inhibitor-NC组;而将转染siRNA-STARD13、pcDNA3.1-STARD13及相应对照的细胞作为siRNA-STARD13组、pcDNA3.1-STARD13组、siRNA-NC组和pcDNA3.1组.将miR-92a mimics或miR-92a inhibitor转染至DU145细胞后,采用RT-PCR检测细胞中miR-92a的表达水平,MTT检测细胞活力,Transwell小室实验检测miR-92a对DU145细胞侵袭和迁移能力的影响,Western blotting检测miR-92a对DU145细胞中STARD13蛋白表达的影响;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-92a和STARD13的靶向关系;将siRNA-STARD13和pcDNA3.1-STARD13过表达质粒转染至DU145细胞后,观察STARD13表达对DU145细胞侵袭和迁移能力的影响.结果 与mimics-NC组比较,miR-92a mimics组细胞中miR-92a的表达水平明显升高(P<0.05);与inhibitor-NC组比较,miR-92a inhibitor组细胞中miR-92a表达水平明显降低(P<0.05).MTT检测结果显示,与mimics-NC组比较,miR-92a mimics组细胞24、48、72 h的细胞活力明显升高(P<0.05);与inhibitor-NC组比较,miR-92a inhibitor组细胞24、48、72 h的细胞活力明显降低(P<0.05).Transwell小室检测结果显示,与mimics-NC组比较,miR-92a mimics组细胞侵袭和迁移能力均明显增强(P<0.05);与inhibitor-NC组比较,miR-92a inhibitor组细胞侵袭和迁移能力均明显减弱(P<0.05).TargetScan软件预测结果显示,miR-92a和STARD13之间存在互补的结合位点;双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,与相应对照mimics-NC组或inhibitor-NC组比较,miR-92a mimics能够使转染STARD13-WT质粒细胞的荧光素酶活性降低,而miR-92a inhibitor能够使其荧光素酶活性升高(P<0.05);此外,Western blotting检测结果显示,与相应对照组比较,miR-92a mimics可使DU145细胞中STARD13蛋白表达水平明显降低,而miR-92a inhibitor则使STARD13蛋白表达水平明显升高(P<0.05).Western blotting检测结果显示,与siRNA-NC组比较,siRNA-STARD13组细胞中STARD13蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-STARD13组细胞中STARD13蛋白表达水平明显升高(P<0.05).MTT检测结果显示,与siRNA-NC组比较,siRNA-STARD13组细胞24、48和72 h的细胞活力明显升高(P<0.05);与pcDNA3.1组比较,pcDNA3.1-STARD13组细胞24、48、72 h的细胞活力明显降低(P<0.05).Transwell小室实验结果结果显示,siRNA-STARD13组细胞侵袭和迁移能力均明显高于siRNA-NC组,而pcDNA3.1-STARD13组细胞侵袭和迁移能力均明显低于pcDNA3.1组(P<0.05).结论 miR-92a可通过靶向调控STARD13表达促进前列腺癌DU145细胞侵袭和迁移.