LncRNA SNHG5调控miR-23a-3p影响恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的作用机制

摘要

目的 探讨长链非编码RNA SNHG5(LncRNA SNHG5)对恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养人黑色素瘤细胞株A375、G361、M14、WM115与人类皮肤黑色素细胞(NHEM).实验将A375细胞随机分为NC组、si-con组、si-SNHG5组、si-SNHG5+ anti-miR-con组、si-SNHG5+ anti-miR-23a-3p组.采用qRT-PCR法检测细胞SNHG5与miR-23a-3p表达.MTT法与Annexin V/PI染色法检测转染后各组A375细胞增殖活性及凋亡率.采用双荧光素酶报告实验证实SNHG5的靶作用位点.Western blotting法检测Bcl-2、Bax及AKT信号通路相关蛋白表达.结果 与NHEM相比,不同黑色素瘤细胞中SNHG5表达水平显著上调(P＜0.05),而miR-23a-3p表达水平显著下调(P＜0.05);沉默SNHG5表达可显著抑制黑色素瘤A375细胞增殖并促进细胞凋亡;双荧光素酶报告实验证实miR-23a-3p是SNHG5的直接靶点;干扰miR-23a-3p可部分逆转沉默SNHG5对A375细胞的抑制作用;沉默SNHG5表达可促进Bax表达,抑制Bcl-2与p-AKT表达,但沉默miR-23a-3p后Bcl-2与p-AKT表达上调,而Bax表达下调.结论 沉默SNHG5通过调控miR-23a-3p表达进而抑制黑色素瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡.