马铃薯低温启动子CIP的克隆及其功能鉴定

摘要

合适的启动子有利于基因的高效表达.本研究从鄂马铃薯-3中克隆了低温诱导的启动子(CIP,),并调控转化酶抑制子基因转化马铃薯植株,以抑制马铃薯块茎发生的"低温糖化".实验结果表明,克隆的CIP与报道的低温诱导的启动子序列同源性达98.9%,含有启动子的典型结构.构建CIP与转化酶抑制子(St-VIF)基因的载体成功转化马铃薯并获得转基因株系.转基因株系收获块茎在4℃和20℃贮藏1m,Nothern杂交显示Dt-VIF基因在4℃大量表达,检测转化酶活性表明,与对照比较液泡转化酶活性大大降低,说明通过低温诱导CIP调控St-VIF基因的表达能够抑制转化酶的活性,从而降低还原糖的积累.