脐血移植后SCID鼠的免疫功能重建及抗人肝癌作用的初步研究

摘要

目的 证实脐血造血干/祖细胞移植重建SCID鼠的免疫功能对人肝癌有抑制及杀伤作用.方法 首先进行人肝癌高转移细胞株HCCLM6细胞培养,然后将HCCLM6细胞株分别在脐血移植免疫功能重建组(A组)及未移植脐血造血干/祖细胞组(B组)建立SCID鼠皮下荷瘤模型.接种肿瘤后5周处死,分别进行以下检测:(1)比较A、B两组间肿瘤生长情况的差异；(2)常规病理学检查:比较A、B两组移植瘤状况,并观察有无肿瘤转移；(3)免疫组化检查:观察肿瘤组织中人源CD3+、CD8+细胞对肿瘤组织的杀伤力；(4)细胞毒试验:A、B两组动物脾脏细胞与HCCLM6细胞体外混合培养,采用MTT法观察对肿瘤细胞的杀伤作用.结果(1) HCCLM6细胞株接种于A组、B组SCID小鼠皮下均可成瘤,成瘤率为100％,成瘤潜伏期分别为(9.83±1.47)d、(5.16±1.17)d,二组比较差异有统计学意义(P＜0.01)；接种后5周移植瘤体积分别为(539.22±94.08)mm3、(1 126.17±154.75) mm3,二组比较差异有统计学意义(P＜0.01).(2)病理学检查可见:A组肿瘤坏死明显,未见远处转移；B组坏死程度明显较轻,可见肺转移.(3)免疫组织化学检查:A组肿瘤组织中可见大量人源CD3+、CD8+细胞浸润,坏死组织周围更加明显；B组移植瘤内亦有肿瘤坏死,但未见人源淋巴细胞.(4)细胞毒试验表明:A组脾脏细胞对HCCLM6细胞的杀伤作用明显,在效靶比例为120∶1时,特异性杀伤率为(7.41±1.07)％；B组脾脏细胞对肝癌细胞的杀伤率为(3.97±0.27)％,二组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HCCLM6是一个活力强、代谢活跃的肿瘤细胞亚群.人源脐血干细胞在SCID鼠体内重建免疫后可发挥对HCCLM6细胞的杀伤作用,对肝癌的生长有抑制作用.脐血干细胞移植有可能成为肝癌治疗的一种新方法,其应用前景值得进一步研究探讨.