人组织激肽释放酶基因真核表达载体的构建与鉴定

摘要

目的构建并鉴定人组织激肽释放酶基(h-TKK)基因真核表达质粒.方法设计含pnI和BamHⅠ酶切位点的人组织激肽释放酶基因引物,采用PCR法从原核pBluescripe Ⅱ KSKK(+)中扩增KKcDNA片段,亚克隆至pAdtrack-CMV真核表达载体,转化感受态大肠杆菌DH10B,酶切鉴定阳性重组子,并进行序列测定.结果经PCR能扩增出738 bp 的片段,与预期片段大小相符,构建的重组体经酶切鉴定能切出插入片段,测序结果与预期序列完全一致.结论成功构建了人组织激肽释放酶基因真核表达重组体pAdtrack-CMV KK.