应用实时荧光PCR技术快速检测B群链球菌

摘要

目的 建立一种能够快速、准确、特异地检测B群链球菌(GBS)的实时荧光PCR检测技术.方法 以B群链球菌cfb基因的保守区为靶区域设计特异引物和TaqMan荧光探针,然后优化反应条件和反应体系,建立检测B群链球菌的实时荧光PCR方法,通过检测实验菌株、对照菌株以及模拟血液、尿液标本对该方法的特异性、敏感性以及灵敏度进行评价.结果 实时荧光PCR方法检测7株B群链球菌均为阳性,其他对照实验菌株均为阴性,且当菌液浓度为 20 cfu/mL时,也能获得阳性结果,说明荧光定量PCR法敏感性、特异性以及灵敏度均较高.对模拟尿液标本进行检测时,其敏感性为90%,特异性为100%,检测下限约为2 cfu/反应体系.由于标本类型和处理方式的不同,对模拟血液标本进行检测时,其检测灵敏度约为100 cfu/mL,低于模拟尿液标本的检测灵敏度.结论 建立的荧光定量PCR技术方法为GBS的快速诊断以及更加准确有效地进行抗生素预防提供了依据,也为在新生儿中进行早发型GBS感染的快速准确诊断提供了新的思路.