Ficolin 在小鼠体内结肠癌细胞系 CT26生长效应及其机制

摘要

目的：研究Ficolin 的抗结肠癌作用，并初步探究其作用机制。方法建立不同免疫细胞缺失的小鼠荷瘤模型，研究Ficolin 的抗结肠肿瘤效应及其效应细胞；流式细胞仪检测小鼠结肠癌细胞（ CT26）与Ficolin 及其截短突变蛋白的结合；用ELISA 方法检测Ficolin 及其截短突变蛋白刺激BALB／c小鼠腹腔巨噬细胞释放细胞因子情况；C4沉积实验检测Ficolin 蛋白与CT26结合后激活补体凝集素途径情况。结果 Ficolin－2与FicolinA能明显抑制荷瘤小鼠背部肿瘤的生长；当荷瘤小鼠体内巨噬细胞去除后，Ficolin－2与Ficolin A抑制荷瘤小鼠背部肿瘤的生长效应消失；Ficolin－2与Ficolin A蛋白能与CT26细胞结合，并呈现剂量依赖性；Ficolin－2的截短突变蛋白D1、D2能与CT26细胞结合，D3不能与CT26细胞结合；Ficolin－2与FicolinA蛋白能明显刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放细胞因子，如一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子α（TNF－α）、白细胞介素17A（IL－17A）、白细胞介素6（IL－6）及白细胞介素22（IL－22）；而Ficolin－2的截短突变蛋白D1、D2、D3却不能刺激巨噬细胞释放上述细胞因子；Ficolin－2与Ficolin A蛋白能激活补体凝集素途径。结论 Ficolin－2与Ficolin A能明显抑制荷瘤小鼠背部肿瘤的生长，而荷瘤小鼠体内的巨噬细胞被去除后，Ficolin－2与Ficolin A抗结肠癌效应受到抑制。体外实验发现，Ficolin－2与Ficolin A可能是通过刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放NO、TNF－α、IL－17A、IL－6及IL－22细胞因子发挥抗结肠癌作用；Ficolin－2与Ficolin A也能激活补体凝集素途径。 Ficolin通过其C端与CT26结合，而其发挥生物学活性则需要N端与C端的共同存在。