SHP -1基因在曲妥珠单抗致心肌细胞凋亡中的调控作用

摘要

目的：初步观察转染 SHP -1基因前后大鼠心肌 H9C2细胞对抗曲妥珠单抗的能力，SHP -1蛋白表达情况及转染 SHP -1基因对 H9C2细胞增殖能力的影响。方法构建真核表达载体 pcDNA3.1（﹢）- SHP -1和 pcDNA3.1（﹢）- SHP -1C/ S，利用脂质体转染法转染大鼠心肌 H9C2细胞，经 G418筛选阳性克隆，阳性克隆细胞在曲妥株单抗中维持生长。用 Western blot 检测 SHP -1基因在大鼠心肌 H9C2细胞中的稳定表达情况，并通过流式细胞学观察细胞凋亡曲线。结果蛋白水平证实，转染细胞内有 SHP -1基因的表达，并且转染 pcDNA3.1（﹢）- SHP -1的心肌细胞 SHP -1表达明显升高，经曲妥珠单抗干预后蛋白表达量下降。转染 pcDNA3.1（﹢）-SHP -1后 H9C6细胞在曲妥珠单抗中凋亡率明显升高（P ＜0.05）。结论向大鼠心肌 H9C2细胞内转染 SHP -1基因并使其稳定表达，可以促进大鼠心肌 H9C2细胞的在曲妥珠单抗中的凋亡，为以后进一步探讨 SHP -1基因的功能打下了基础。