氯化高铁血红素诱导K562细胞红系定向分化细胞模型的构建

摘要

目的 研究氯化高铁血红素(Hemin)诱导K562细胞红系定向分化的效果及血红蛋白含量、FUT1基因表达变化,构建K562细胞红系定向分化模型.方法 50μmol/L Hemin作用于K562细胞1～7d,测联苯胺染色阳性率,RT-PCR法检测FUT1基因mRNA表达量变化;5～7 d分为持续诱导组和无诱导组,以Hemin诱导前1d、0h为对照组,检测两组联苯胺染色阳性率及FUT1基因mRNA表达量变化.结果 Hemin持续诱导K562细胞第1～7天,联苯胺染色阳性率在4d达高峰,后逐步下降;3、4、5d联苯胺染色阳性率之间比较差异无统计学意义(F=28.55,P＞0.05).5～7d持续诱导、无诱导两组间比较,联苯胺染色阳性率差异有统计学意义(F=22.001,P＜0.05).Hemin诱导1～7d的FUT1 mRNA相对表达量分别为对照组的0.667±0.004、0.616±0.006、0.615±0.029、1.138±0.049、0.66±0.002、0.752±0.029、0.674±0.014倍.结论 Hemin可诱导K562细胞红系定向分化,K562细胞经Hemin诱导第4天联苯胺染色阳性率、FUT1基因mRNA表达量最高.选择诱导3d的K562细胞为模型,持续Hemin诱导,进行人工干预FUT1基因表达的研究,为ABO血型不合移植适应性调节研究奠定实验基础.