基于Wnt/β-catenin信号通路探讨白茅根多糖对哮喘气道重塑的作用

摘要

目的基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨白茅根多糖对哮喘气道重塑的改善作用及机制.方法选无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级雄性Sprague Dawley(SD)大鼠35只,随机分为5组:空白组(生理盐水处理)、模型组、地塞米松组、白茅根多糖低剂量组、白茅根多糖高剂量组,每组7只.卵清蛋白致敏诱导哮喘大鼠模型,造模成功后,分为模型组(生理盐水)、地塞米松组(0.5 mg/kg)、白茅根多糖低剂量组(10 mg/kg)、白茅根多糖高剂量组(20 mg/kg),灌胃给药治疗,连续8周.采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;免疫组组织化学法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;瑞士-吉姆萨染色分类计数支气管肺泡灌洗液中的炎症细胞数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13含量及血清中免疫球蛋白E(IgE)、TNF-α、IL-6含量;吸入乙酰甲胆碱测定大鼠气道高反应性;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)/蛋白免疫印迹(Western blot)检测肺组织Wnt5a、Wnt7a、β-catenin、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)mRNA或蛋白表达.结果与空白组相比,模型组肺泡隔增厚伴炎细胞浸润,炎性细胞浸润评分、中性粒细胞、淋巴细胞数、气道阻力及TNF-α、IL-4、IL-5、IL-13、IgE、IL-6含量明显升高,肺组织α-SMA及Wnt5a、Wnt7a、β-catenin、GSK-3βmRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,白茅根多糖高剂量组能显著抑制哮喘中性粒细胞、淋巴细胞数,降低气道阻力及TNF-α、IL-4、IL-5、IL-13、IgE、IL-6含量,并抑制肺组织α-SMA及Wnt5a、Wnt7a、β-catenin、GSK-3βmRNA和蛋白表达(P<0.05).结论白茅根多糖可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路的激活来改善哮喘大鼠气道重塑,具有抑制哮喘的效果.