鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白原核表达载体的构建

摘要

本研究旨在构建鸡传染性支气管炎病毒(IBV)原核表达体系,制备其S1目的蛋白,为建立IBV ELISA检测方法奠定基础.以IBV QX型基因为模板,PCR扩增出S1蛋白基因,连接至pET-32a原核表达载体,获得重组质粒pET(32a)-S1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞后进行IPTG诱导表达.SDS-PAGE分析结果表明,重组S1蛋白在大肠杆菌BL21中获得表达,分子量约为60 kDa.Western-blot分析表明,重组蛋白能与Anti-His标签抗体发生特异性反应.利用Kcl染色法,成功纯化S1目的蛋白.本研究成功构建了pET(32a)-S1重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,为进一步制备S1蛋白抗体奠定了基础.