鼠源巨噬细胞RAW264.7中TNF-α 基因的克隆及酶切鉴定

摘要

TNF-α 能诱导单核巨噬细胞系统的前体细胞分化,是机体非特异性免疫检测中指示性细胞因子.本研究根据Genbank NM-013693上登录的小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)序列对经过氨基多糖纳米微粒处理过的小鼠RAW264.7细胞进行RNA的提取,且RT-PCR扩增TNF-α 基因.将此片段克隆到PUCm-T载体中,经菌落PCR鉴定和DNA序列测定、酶切鉴定分析验证,证实所克隆序列为TNF-α 基因.序列分析表明,该基因与Genbank中发表序列的同源性达到100%.