RT-PCR技术检测猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)

摘要

根据猪PRRSV的ORF7基因序列,设计并合成了1对引物,以PRRSV RNA为模板,筛选最佳反应条件,建立了检测PRRSV的RT-PCR方法.应用该方法对病毒细胞培养物进行基因扩增,均获得了分子量为443 bp的特异性目的片段,而对PCV2、PRV、CSFV及Marc-145细胞进行同条件检测,结果均为阴性;PRRSV扩增产物测序结果与文献报道的PRRSV其他毒株序列同源性达92%～98%.敏感性试验表明,该体系可检测到2.39TCID50的PRRSV;对2004～2005年送检的81份临床样品进行检测,阳性率为23.4%.上述研究结果表明,建立的RT-PCR特异性好、敏感性高,可用于猪繁殖与呼吸综合征的诊断和流行病学调查.