火龙果ISSR优化体系的建立

摘要

为建立稳定的火龙果ISSR-PCR反应体系,采用单因素与正交设计试验相结合的方法,对ISSR反应体系中的主要因素进行了优化筛选.结果表明,20 μL ISSR反应体系中各主要成分的最适浓度分别为10×Buffer(含Mg2+)2.0 μL,DNA 20.0 ng、0.30 mmol·L-1 dNTP、引物0.35 μmol·l-1、Taq DNA聚合酶为1.5 U,引物(AC)8T的最佳退火温度为54.0℃.利用优化得到的体系对6份火龙果材料进行检验,结果表明优化后的体系适合火龙果的ISSR-PCR反应.