含FMDV中和表位的重组病毒颗粒的构建及鉴定

摘要

针对FMDV的疫苗研究一直是防控口蹄疫的重点,而病毒样颗粒（VLPs）形式的疫苗因其安全性和近似传统灭活疫苗的良好免疫效果,近年来逐渐成为疫苗研究的一个新方向.本实验利用猪圆环病毒PCV2的衣壳蛋白（CAP）作为载体,分别插入FMDV MYA98毒株的抗原表位组合——VP1蛋白上B细胞表位141～160aa（B）与串联的B细胞和T细胞表位141～160aa-21～40aa-141～160aa（BTB）,构建对应重组杆状病毒,分别命名为reBAC-CAP-B,reBAC-CAP-BTB.将上述病毒颗粒转入Sf9细胞表达,收获重组杆状病毒并再次感染Sf9细胞扩大病毒滴度,获得目的蛋白CAP-B,CAP-BTB,经过SDS-PAGE,Western blot鉴定正确,透射电镜观察到20～30nm大小的目的颗粒.