表达O型口蹄疫VP1中和表位的重组猪圆环病毒2型毒株的构建及其生物学特性鉴定

摘要

为构建以猪圆环病毒2型(PCV2)为载体表达O型口蹄疫病毒(FMDV)中和表位的重组病毒，本研究将FMDV-VP1蛋白中和抗原表位区(第141—160位氨基酸)插入到PCV2-ORF2编码的Cap蛋白C-末端，利用感染性克隆技术拯救出一株表达FMDV-VP1的中和抗原表位PCV2重组毒株，命名为recPCV2-CL-VP1。采用免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、捕获ELISA和免疫电镜鉴定该重组病毒。结果表明，在病毒感染细胞中检出PCV2特异性抗原及VP1表位抗原;重组病毒的形态学特征与亲本病毒相似，可采用PCR和ELISA法相鉴别;拯救毒株的繁殖能力较亲本毒差，经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定。本研究成功地构建了一株表达FMDV-VP1中和抗原表位的PCV2重组病毒，为进一步研制基因工程疫苗奠定了基础。