麻竹RAPD反应条件的优化

摘要

以麻竹DNA为模板,对影响麻竹RAPD扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立麻竹RAPD反应的最适体系.最终得出的麻竹RAPD反应体系为:20 μL反应体系,2 μL 10倍反应缓冲液,模板含量为50 ng,2.5 mmol*L-1的Mg2+,1.5 U的Taq酶, dNTP为1.75 mmol*L-1,引物浓度为0.4 μmol*L-1.优化后的RAPD反应程序为:94 ℃ 3 min→[94 ℃ 1 min→37.5 ℃ 1 min→72 ℃ 1 min 20 sec]40个循环→72 ℃ 8 min→4 ℃保持.