超声波对大豆胰蛋白酶抑制剂活性及二级结构的影响

摘要

研究了Kunitz型大豆胰蛋白酶抑制剂(KSTI)和Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂(BBTI)经超声波处理后的活性、巯基含量、远紫外圆二色谱的变化.发现KSTI和BBTI的单-吸收负峰在200nm波长处,KSTI的[θ]200nm=-2545deg·cm2·d/mol,,其二级结构由22.5%β折叠,16.25%β转角和61.4%无规卷曲组成;BBTI的[θ]200nm=-797deg·cm2·d/mol,由52.6%β折叠和47.4%无规卷曲组成.用65%振幅的超声波场处理11min后,KSTT的[θ]200nm值变为-1827 deg·cm2·d/mol,处理20min后,其β转角和无规卷曲的含量分别下降至10.8%和54%,而β折叠的含量则增加至35.2%,同时有约71.5%的二硫化键转变成巯基,对胰蛋白酶的抑制活性则被钝化55%;而BBTI的二级结构则表现稳定,65%振幅的超声波场处理20min后,[θ]200nm值只改变为-700deg·em2·d/mol,其β折叠、无规卷曲结构以及对胰蛋白酶的抑制活性基本上不受影响,仅有5.29%的二硫键转化成巯基.超声波可能是通过影响KsTT的二硫键,使其二级结构发生变化,从而影响其活性.