强阳离子交换色谱法从牛初乳中分离纯化乳铁蛋白的研究

摘要

本实验研究了离子交换色谱技术大规模纯化乳铁蛋白的色谱条件.选用的SP Sepharose Fast Flow离子交换剂对乳铁蛋白有很好的吸附选择性,洗脱速度可达到2L/h.以pH值为7.7～8.0,10mmol/L的磷酸盐为起始缓冲液,通过改变离子强度进行分步洗脱.先采用0.5mol/L的NaCl溶液选择性洗脱分泌型免疫球蛋白A和乳过氧化物酶组分,再采用1mol/L的NaCl洗脱LF组分.经SDS-PAGE测定,所得乳铁蛋白组分显示为单一区带,相对分子质量为80400Da.经等点聚焦测定,所得乳铁蛋白的等电点为8.65.中试生产的精制品中乳铁蛋白的纯度和回收率分别为94.20%和75.45%.