油菜蜂花粉蛋白水解度测定方法比较

摘要

采用Alcalase 2.4L FG水解油菜蜂花粉蛋白,比较pH stat法、OPA法和TNBS法测定蜂花粉蛋白水解度的差异.水解118min后,pH stat法、OPA法和TNBS法测得的水解度分别为24.7%、13.4%、6.6%.由于OPA试剂和甘氨酸、半胱氨酸、赖氨酸反应生成的化合物在340nm波长处的吸光度较低,致使OPA法测得的水解度低.TNBS试剂和ε-NH2的作用不稳定,也可能是由于TNBS试剂产生的发光物使测定结果降低.在水解度较低的情况下,α-NH2平均解离度的变化可以忽略,pH stat法测得的水解度比较准确.